技術參數
產品描述
【摘要】
本試劑盒用于體外定性檢測人咽拭子樣本中的的甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒及肺炎支原體核酸，高靈敏度和特異性的核酸檢測可一次檢測多種病毒，全程檢測時間約1小時，可實現對呼吸道感染病的早發(fā)現、早隔離、早報告和早治療，及早為臨床提供準確的診療和感染防控依據。
【檢驗原理】
六項呼吸道病原體核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)采用Taqman熒光探針法，針對甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒及肺炎支原體的高度保守且特異性區(qū)域，設計熒光檢測的引物探針，采用不同的熒光基團進行標記，檢測過程中的核酸經逆轉錄為cDNA，在擴增過程中，特異性引物和探針與靶序列結合，通過Taq酶的DNA聚合酶活性和5’-3’外切酶活性實現PCR產物形成與熒光信號累積完全同步;通過檢測不同熒光基團信號實現對樣本中甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒及肺炎支原體核酸的定性檢測。
試劑盒含有內參設置，作為對試劑、核酸質量以及操作本身的質控，避免檢測結果假陰性。
【檢驗方法】
1. 試劑準備
1.1. 取出試劑盒中反應buffer及引物探針Mix，室溫放置，待完全融解后，振蕩混勻，離心備用;取出試劑盒中的檢測酶液，離心后備用。
1.2. 根據需準備樣品數N(N=樣本數+1管陽性質控品+1管陰性質控品)配制PCR-Mix，向熒光定量PCR八聯反應管中分裝每孔20μL PCR-Mix，用畢反應buffer、引物探針Mix和檢測酶液立即放入-18℃以下凍存。
2. 樣本處理
樣本收到后先采用水浴鍋56℃30min進行滅活。
提取采集的咽拭子樣本，應保證RNA滿足實驗需要的RNA數量，提取的RNA樣品立即檢測或于-70℃以下保存(不超過7天);同時取相應體積的陽性質控品和陰性質控品進行提取。
3. 加樣
在所設定好的每個反應管中分別依次加入步驟2中提取的陰性質控品提取RNA、陽性質控品提取RNA、待測樣本RNA，各10µL，蓋緊管蓋，簡短離心。
4.實時擴增(詳見說明書)
4.1儀器通道及反應體積選擇
4.2實時擴增條件設定
5.結果分析
【檢測方法及檢驗結果解釋詳見說明書】
【質量控制】
技術參數
| 檢測原理 | PCR-熒光探針法 | 適用機型 | ABI 7500、宏石SLAN-96P |
| 樣本類型 | 咽拭子 | 包裝規(guī)格 | 50 人份/盒 |
| 檢測時間 | 約1小時 | 有效期 | 9個月 |
| 儲存條件 | -18℃以下避光保存 |
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